ZHRNUTIE A VYSVETLENIE TESTU
Leptospiróza sa vyskytuje na celom svete a je bežným miernym až závažným zdravotným problémom pre ľudí a zvieratá, najmä v oblastiach s horúcim a vlhkým podnebím.Prirodzenými rezervoármi leptospirózy sú hlodavce, ako aj veľké množstvo domestikovaných cicavcov.Ľudskú infekciu spôsobuje L. interrogans, patogénny člen rodu Leptospira.Infekcia sa šíri močom z hostiteľského zvieraťa.
Po infekcii sú leptospiry prítomné v krvi, kým sa neodstránia po 4 až 7 dňoch po produkcii anti-L.interrogans protilátky, spočiatku triedy IgM.Kultivácia krvi, moču a likvoru je účinným prostriedkom na potvrdenie diagnózy počas 1. až 2. týždňa po expozícii.Sérologický dôkaz antiL.Interrogans protilátky sú tiež bežnou diagnostickou metódou.Testy sú dostupné v tejto kategórii: 1) mikroskopický aglutinačný test (MAT);2) ELISA;3) Nepriame fluorescenčné testy protilátok (IFAT).Všetky vyššie uvedené metódy však vyžadujú sofistikované zariadenie a dobre vyškolených technikov.
Leptospira IgG/IgM je jednoduchý sérologický test, ktorý využíva antigény z L. interrogans a súčasne deteguje IgG a IgM protilátky proti týmto mikroorganizmom.Test môže vykonať nezaškolený alebo minimálne kvalifikovaný personál, bez ťažkopádneho laboratórneho vybavenia a výsledok je k dispozícii do 15 minút.
PRINCÍP
Leptospira IgG/IgM Rapid Test Kit je laterálna prietoková chromatografia
imunotest.Testovacia kazeta pozostáva z: 1) bordovo sfarbenej konjugovanej podložky obsahujúcej rekombinantné antigény L. interrogans konjugované s koloidným zlatom (konjugáty Leptospira) a konjugátmi králičieho IgG-zlato, 2) prúžku nitrocelulózovej membrány obsahujúceho dva testovacie prúžky (pásiky M a G) a kontrolné pásmo (pásmo C).Pás M je vopred potiahnutý monoklonálnym anti-humánnym IgM na detekciu anti-L.. interrogans IgM, pás G je vopred potiahnutý činidlami na detekciu anti-L.interrogans IgG a C pás je vopred potiahnutý kozím anti králičím IgG.
Keď sa do jamky na vzorku v kazete nadávkuje primeraný objem testovanej vzorky, vzorka migruje kapilárnym pôsobením cez kazetu.IgM anti-L.. interrogany, ak sú prítomné vo vzorke, sa budú viazať na konjugáty Leptospira.Imunokomplex je potom zachytený na membráne pomocou vopred potiahnutej anti-humánnej IgM protilátky, čím sa vytvorí bordovo sfarbený M pásik, čo indikuje L.. interrogans IgM pozitívny výsledok testu.IgG anti-L.. interrogany, ak sú prítomné vo vzorke, sa naviažu na konjugáty Leptospira.Imunokomplex je potom zachytený vopred potiahnutými činidlami na membráne, čím sa vytvorí bordovo sfarbený G pás, čo indikuje pozitívny výsledok testu L.. interrogans IgG.
Absencia akýchkoľvek testovacích prúžkov (M a G) naznačuje negatívny výsledok.Test obsahuje internú kontrolu (prúžok C), ktorý by mal vykazovať bordový farebný pás imunokomplexu kozieho anti králičieho IgG/králičieho IgG-zlatého konjugátu bez ohľadu na vývoj farby na ktoromkoľvek z testovacích pásikov.V opačnom prípade je výsledok testu neplatný a vzorka sa musí znova otestovať iným zariadením.
